I - XÉT NGHIỆM ELISA Show
ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) Hay còn gọi là phương pháp ELISA hay EIA (Enzyme ImmunoAssay) là một phương pháp sinh hoá sử dụng chủ yếu trong miễn dịch học để phát hiện sự hiện diện của một kháng thể hoặc kháng nguyên trong một mẫu Hiện nay ELISA được sử dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực nghiên cứu như y học, nông nghiệp và trong các quy trình kiểm tra an toàn chất lượng các sản phẩm sinh học.
Nguyên lý của ELISA chính là dựa vào tính đặc hiệu kháng nguyên - kháng thể và gồm các bước cơ bản như sau: (1) Kháng nguyên - antigen (KN) chưa biết được gắn trên một bề mặt; (2) Kháng thể - antibody (KT) biết trước được "rửa" qua bề mặt đó. Kháng thể này được gắn kết với enzyme; (3) Thêm vào một cơ chất (substance); enzyme sẽ biến đổi cơ chất này và tạo tín hiệu có thể xác định được. Đối với các ELISA phát quang, ánh sáng sẽ được phát ra từ mẫu chứa KN-KT. Sự hiện diện của phức hợp KN-KT sẽ quyết định cường độ sáng phát ra. Với nguyên lý trên, ELISA giúp xác định sự có mặt hay không có mặt cũng như lượng KN trong mẫu nghiên cứu. Các thành phần tham gia phản ứng elisa
Người ta thường chia thành 4 loại :
3.1 Direct ELISA ( ELISA trực tiếp) - Đơn giản và tiết kiệm thời gian Direct ELISA: Đây là dạng đơn giản nhất của phương pháp ELISA. Trong đó, kháng nguyên cần phát hiện sẽ được gắn trực tiếp lên bề mặt giá thể và sẽ được phát hiện bằng một kháng thể duy nhất (kháng thể này đã được gắn enzyme). Ưu điểm của phương pháp ELISA trực tiếp So với các phương pháp ELISA khác, phương pháp này được thực hiện trong thời gian ngắn hơn vì chỉ có một kháng thể được sử dụng và ít bước tiến hành hơn. Điều này có thể được sử dụng để kiểm tra phản ứng kháng thể - kháng nguyên cụ thể, và giúp loại bỏ phản ứng chéo giữa các kháng thể khác. Nhược điểm của phương pháp ELISA trực tiếp Các kháng thể chính phải được đánh dấu riêng, nên tốn nhiều thời gian và không linh hoạt khi thực hiện nhiều thí nghiệm. Ngoài ra, kỹ thuật này có độ nhạy thấp hơn do các tín hiệu được khuếch đại ít hơn, nghĩa là độ nhạy thấp hơn. 3.2 Indirect ELISA (ELISA gián tiếp) Indirect ELISA: Phương pháp này khác Direct ELISA ở chỗ kháng thể bắt kháng nguyên không được gắn enzyme mà nó là mục tiêu gắn đặc hiệu của một kháng thể khác (kháng thể này mới là kháng thể được gắn với enzyme). Các bước tiến hành: - Ưu điểm: Kháng thể gắn enzyme có thể sử dụng để đánh dấu cho nhiều loại kháng nguyên nên tiện lợi và kinh tế hơn, dễ dàng thương mại hóa. 3.3 ELISA sandwich - Độ nhạy cao Đây là một dạng ELISA được sử dụng phổ biến nhất trong thực tiễn do nó cho phản ứng mạnh và nhạy ELISA sandwich định lượng kháng nguyên giữa hai lớp kháng thể (kháng thể bắt- capture và phát hiện- detection). Các kháng nguyên được định lượng phải chứa ít nhất hai epitope kháng nguyên có khả năng liên kết với các kháng thể, ít nhất là với hai kháng thể hoạt động trong kỹ thuật sandwich. Các kháng thể đơn dòng hoặc đa dòng đều có thể được sử dụng như là các kháng thể bắt và kháng thể phát hiện trong hệ thống ELISA sandwich. Kháng thể đơn dòng có một epitope duy nhất cho phép phát hiện và định lượng tốt sự khác biệt nhỏ trong kháng nguyên. Một kháng thể đa dòng thường được sử dụng như các kháng thể bắt giữ càng nhiều kháng nguyên càng tốt. (Epitope- Quyết định kháng nguyên, là vị trí trên kháng nguyên, nơi gắn với kháng thể). Quy trình thực hiện:
Đặc điểm nổi bật của phương pháp Sandwich ELISA: + Mẫu không cần phải được tinh sạch trước khi phân tích. + Độ đặc hiệu cao, vì sử dụng hai kháng thể nên các kháng nguyên/ chất phân tích được bắt và phát hiện đặc hiệu. + Thích hợp cho các mẫu phức tạp, bới vì các kháng nguyên không yêu cầu đòi hỏi phải tinh sạch trước khi tiến hành định lượng. + Linh hoạt và độ nhạy cao, vì cả hai phương pháp phát hiện trực tiếp và gián tiếp đều có thể được sử dụng. Độ nhạy cao hơn 2-5 lần so với phương pháp ELISA trực tiếp hoặc gián tiếp, nhưng thấp hơn ELISpot. 3.4 ELISA cạnh tranh Vấn đề chủ yếu của ELISA cạnh tranh là quá trình gắn cạnh tranh thực hiện bởi kháng nguyên gốc (kháng nguyên mẫu) và kháng nguyên được thêm vào. Quy trình của phương pháp ELISA cạnh tranh khác một vài điểm so với ELISA gián tiếp, ELISA sandwich và ELISA trực tiếp. Quy trình cơ bản : 1. Kháng thể chính- sơ cấp (chưa đánh dấu) được ủ với kháng nguyên mẫu. 2. Phức hợp kháng thể- kháng nguyên sau đó được thêm vào đĩa 96 giếng đã được phủ trước các kháng nguyên tương tự. 3. Kháng thể không bám được sẽ bị loại bỏ thông qua bước rửa đĩa. (Càng nhiều kháng nguyên trong mẫu, càng ít kháng thể sẽ có thể liên kết với các kháng nguyên trong giếng, do đó gọi là "cạnh tranh".) 4. Các kháng thể thứ cấp gắn enzym mà đặc hiệu với các kháng thể sơ cấp sẽ được thêm vào. 5. Thêm cơ chất, enzyme phân giải cơ chất và tạo tín hiệu màu hoặc huỳnh quang. Đối với phương pháp ELISA cạnh tranh, nồng độ kháng nguyên mẫu càng cao, các tín hiệu cuối cùng càng yếu. Ưu điểm chính của phương pháp này là khả năng sử dụng các mẫu thô hoặc không tinh khiết mà vẫn gắn chọn lọc bất kỳ kháng nguyên nào có mặt. (Lưu ý rằng một số bộ kit ELISA cạnh tranh bao gồm kháng nguyên gắn enzyme nhiều hơn là kháng thể gắn enzyme. Kháng nguyên đánh dấu sẽ cạnh tranh vị trí gắn với kháng thể sơ cấp với kháng nguyên trong mẫu (kháng nguyên này không đánh dấu). Kháng nguyên trong mẫu càng nhiều thì càng ít kháng nguyên đánh dấu được giữ lại trong giếng và tín hiệu càng yếu).
+ Độ đặc hiệu cao, sử dụng hai kháng thể nên các kháng nguyên/ chất phân tích được giữ và phát hiện. + Thích hợp cho các mẫu phức tạp, vì các kháng nguyên không đòi hỏi tinh sạch trước khi tiến hành phản ứng. + Tính linh hoạt và độ nhạy cao. + Phát hiện được lượng kháng nguyên ít - kháng nguyên càng ít tín hiệu càng mạnh. 4. Các yếu tố ảnh hưởng đến phản ứng Elisa Các yếu tố ảnh hưởng đến độ nhạy của phản ứng ELISA - Số lượng kháng thể thứ nhất được gắn vào đáy giếng Các yếu tố ảnh hưởng đến kết quả ELISA
II ỨNG DỤNG CỦA ELISA . Kỹ thuật Elisa (Enzyme-linked immunosorbent assay) là một phương pháp sinh hoá sử dụng chủ yếu trong miễn dịch học để phát hiện sự hiện diện của một kháng thể hoặc kháng nguyên trong một mẫu. Sau đây là một số ứng dụng chính của Elisa. Trong y học kĩ thuật elisa được sử dụng phổ biến, và là xét nghiệm rất hữu ích để :
Trong thực phẩm
III - HỆ THỐNG XÉT NGHIỆM ELISA - HÃNG AWARENESS - XUẤT XỬ MỸ Hiểu được các giá trị quan trọng của xét nghiệm Elisa mang lại cho chẩn đoán tác nhân gây bệnh trong y học , Hãng Awareness – Mỹ đã cho ra thị trường các dòng máy xét nghiệm Elisa hiện đại, giúp thực hiện phản ứng nhanh hơn, an toàn hơn, cho kết quả chính xác cao. Hiện nay các dòng máy xét nghiệm Elisa của Hãng Awareness có mặt rất nhiều nơi trên thế giới trong đó có Việt Nam. Tại thị trường Việt Nam, CÔNG TY TNHH THIẾT BỊ KHOA HỌC VÀ Y TÊ MPT là đơn vị độc quyền phân phối các sản phẩm máy xét nghiệm hãng Awareness trong đó có máy xét nghiệm ELISA tự động và bán tự động. Sau đây công ty chúng tôi xin giới thiệu các sản phẩm máy xét nghiệm ELISA – hãng AWARENESS mà công ty đang phân phối: MÁY MIỄN DỊCH ELISA TỰ ĐỘNG 1. MÁY PHÂN TÍCH ELISA & CLIA TỰ ĐỘNG Model: ChemWell® Fusion Tính năng: - ChemWell Fusion là bộ xử lý miễn dịch hoàn toàn tự động với một hệ thống quang học độc đáo tự động đọc cả xét nghiệm đo màu và phương phấp chemiluminescent. 2. MÁY SINH HÓA MIỄN DỊCH CHEMWELL 2910Máy phân tích sinh hóa và miễn dịch tự động XUẤT XỨ: MỸ Tiêu chuẩn FDA, FDA, ISO 13485:2003, NRTL, CE, NIST Hàng mới 100%, Kèm giấy phép Bộ y tế, CO, CQ,... HAI ỨNG DỤNG TRONG 1 THIẾT BỊ (PHÂN TÍCH SINH HÓA + XÉT NGHIỆM MIỄN DỊCH ELISA) Tính năng: + Máy có thể thực hiện đồng thời cả xét nghiệm sinh hóa và miễn dịch nên có nhiều ý nghĩa trong thực tế. - Có thể thực hiện các Xét nghiệm sinh hóa như: 3. MÁY XN MIỄN DỊCH TỰ ĐỘNG CHEMWELL 2 Model: Chemwell 2 Hãng sản xuất: Awareness - Mỹ Xuất xứ: Mỹ Tính năng: ChemWell 2 là một máy phân tích 2 tấm microwell, thực hiện cả xét nghiệm ELISA và các xét nghiệm CLIA trên các tấm microwell chuẩn hoặc khay 8 microwell. Máy phân tích linh hoạt có thể chạy các phương thức xét nghiệm hỗn hợp trên mỗi 2 tấm microwell, chuyển đổi giữa các CLIA và ELISA hoặc chạy riêng mỗi tấm hoặc cả hai tấm microwell theo một phương pháp cụ thể. ChemWell 2 là một hệ thống mở sẽ cho phép bạn tạo một danh sách các test xét nghiệm, thương mại có sẵn từ nhiều nhà cung cấp. Dễ dàng sử dụng phần mềm bao gồm, tự kiểm tra, cơ sở dữ liệu bệnh nhân, Quản lý chất lượng và các tùy chọn báo cáo. + Với hai thiết bị thăm dò, một cho chất phản ứng và một cho mẫu, với tùy chọn đầu dùng một lần + Tích hợp 8 đầu rửa đa dạng với thể tích rửa có thể điều chỉnh, được gom lại trong khay hóa chất + Tấm trộn với nhiệt độ ủ lên đến 37˚C + Tích hợp chức năng quét mã vạch của các ID mẫu bệnh nhân + Có khả năng cảm biến khay mẫu, thiết bị sẽ ghi chép và theo dõi vị trí của các mẫu được quét + Phần mềm mạnh mẽ của ChemWell 2 cung cấp thông tin phản hồi của bo mạch xử lý trong suốt thời gian hoạt động + Theo dõi và báo cáo Quản lý chất lượng Levy-Jennings HỆ THỐNG MÁY XÉT NGHIỆM ELISA BÁN TỰ ĐỘNGHệ thống bao gồm 3 máy sau:
1. Máy đọc elisa model: Chromate 4300MÁY ĐỌC ELISA Tính năng: Hệ thống mở và thiết kế nhỏ gọn 2. Máy rửa khay ELISA Awareness Stat Fax 2600Tính năng: - Thiết bị rửa tự động hoàn toàn - Có khả năng rửa tất cả các loại khay plate 96 giếng chữ U, V, phẳng và strips.Người sử dụng không cần hiệu chỉnh máy, thiết bị tự động hiệu chỉnh, liên kết và tự động dò tìm hàng kết thúc. - Bơm bên trong dùng cho các trường hợp đòi hỏi vận hành êm. 3. Máy ủ, lắc Stat Fat 2200 MÁY
Ủ LẮC LẮC KHAY VI THỂ Xuất xứ: Mỹ Hàng mới 100%, Kèm giấy phép Bộ y tế, CO, CQ, Tính năng: - Ủ và hoặc lắc được hai bản phate 96 giếng. 4. Ngoài ra chúng tôi còn phân phối các model khác: MÁY ĐỌC XÉT XN MIỄN DỊCH LUMI STAT MODEL: LUMI STAT HÃNG SẢN XUẤT: AWARENESS-MỸ MÁY ĐỌC ELISA STAT FAX 4200MÁY ĐỌC ELISA MÁY ĐỌC ELISA STAT FAX 4700 MÁY ĐỌC KHAY VI THỂ HÃNG AWARENESS - MỸ Để được tư vấn tận tình và mua hàng với giá ưu đãi nhất, mời quý khách hàng liên hệ tự tiếp với chúng tôi: VP Hà Nội: Số 118 Nguyễn Ngọc Nại, Quận Thanh Xuân, Hà Nội Tel: 024 3 5561819 - 024 22 4321 46 - 024 22 188 222 Fax: 024 35563520 Email: Website: http://www.mptmed.com.vn VP Đà Nẵng: 205 Tiểu La, Quận Hải Châu, TP Đà Nẵng Tel: 0236 6567 888 - 0985 485 308 Fax: 0236 6567 889 Email: Website: www.thietbiyte.info VP TP Hồ Chí Minh: 95 Ca Văn Thỉnh, P. 11, Quận Tân Bình, TP Hồ Chí Minh. Tel: 028 62 730 528 - 0943521009 Fax: 028 62 730 529 Email: Website: www.thietbiyte-mpt.com Hotline: 0916 582 608 |